黃曲霉毒素測定----柱后碘衍生法
發(fā)布時間: 2026-03-06 點擊次數(shù): 14次
Aflatoxin是一種具有強致癌性的真菌毒素,廣泛存在于糧食、油料、中藥材等產(chǎn)品,對食品安全和消費者健康構成潛在風險。我國已明確其要求并制定了相應的檢測標準。然而,常規(guī)的熒光檢測方法易受基質(zhì)干擾和熒光猝滅效應的影響,難以實現(xiàn)對低含量樣品的準確定量。
Pribolab MDS 3000S 柱后衍生系統(tǒng)與高效液相色譜聯(lián)用,可在線實現(xiàn)碘衍生,提高AflatoxinB?、G?的熒光強度,提升檢測靈敏度與結果穩(wěn)定性,符合GB 5009.240國家標準檢測要求。本方案基于該系統(tǒng)建立穩(wěn)定可靠的檢測方法,為原料驗收、過程控制及成品放行提供技術支持。
1. 檢測原理
AflatoxinB?、G?自身熒光弱且易猝滅,無法直接實現(xiàn)高靈敏檢測。通過Pribolab MDS 3000S 柱后衍生系統(tǒng),在色譜柱后在線引入碘溶液,與 B?、G?分子中的雙鍵發(fā)生加成反應,生成熒光強度高、性質(zhì)穩(wěn)定的碘代衍生物。該反應在加熱條件下效率更高,可顯著提升熒光信號,消除基質(zhì)與流動相的猝滅干擾,最終實現(xiàn)對Aflatoxin B?、G?的高靈敏度、高選擇性熒光檢測。
2. 儀器方法
2.1 液相方法
色譜柱:Pribolab®Aflatoxin衍生專用色譜柱(貨號:EH04080)
流動相:A 相,水;B相,乙腈-甲醇(50+50)
柱溫:40℃
激發(fā)波長:360nm 發(fā)射波長:440nm
進樣量:50μL
流速:1mL/min
2.2 衍生方法
衍生試劑:Pribolab®Aflatoxin衍生試劑包(貨號:YS-AF-005)
衍生溫度:70℃
流 速:0.2mL/min
3. 檢測結果
3.1 線性
分別精密吸取以下濃度對照品溶液,注入液相色譜儀:
AFB1:0.5ng/mL、2 ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、40ng/mL
AFB2:0.15ng/mL、0.6 ng/mL、1.5ng/mL、3ng/mL、6ng/mL、12ng/mL
AFG1:0.5ng/mL、2 ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、40ng/mL
AFG2:0.15ng/mL、0.6 ng/mL、1.5ng/mL、3ng/mL、6ng/mL、12ng/mL
以峰面積為縱坐標,濃度為橫坐標,繪制標準曲線,結果表明曲線線性關系良好,線性相關系數(shù)均大于0.999。
3.2重復性
取濃度為AFB1:AFB2:AFG1:AFG2(5:1.5:5:1.5)ng/mL 的Aflatoxin標準品溶液,連續(xù)進樣 6 針,記錄各針峰面積與保留時間。結果顯示,6 針檢測的峰面積相對標準偏差(RSD):AFB1為3.82%、AFB2為0.92%、AFG1為0.46%、AFG2為1.21%,符合檢測方法學要求。
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